盡管沒(méi)有“路線(xiàn)圖"詳細(xì)說(shuō)明獲得監(jiān)管部門(mén)批準(zhǔn)進(jìn)入臨床所需的研究,但??FDA、EMA 和 PMDA 最近發(fā)布的文件強(qiáng)調(diào)了 候選藥物的代謝和藥物相互作用 (DDI)的潛力。
FDA 2020 年最終確定的行業(yè)指南強(qiáng)調(diào)了臨床前開(kāi)發(fā)中 DDI 成分的重要性和標(biāo)準(zhǔn)化,指出“對(duì) DDI 的研究不充分可能會(huì)阻礙 FDA 確定研究藥物的益處和風(fēng)險(xiǎn)的能力,并可能導(dǎo)致限制性標(biāo)簽、上市后要求或承諾"和/或推遲批準(zhǔn),直到獲得有關(guān) DDI 的足夠信息。"?
臨床前數(shù)據(jù)包中藥物相互作用研究的目的是通過(guò)基于風(fēng)險(xiǎn)的方法預(yù)測(cè)與伴隨藥物發(fā)生有害相互作用的可能性,從而防止患者不必要地被排除在臨床試驗(yàn)之外。
監(jiān)管機(jī)構(gòu)已發(fā)布了關(guān)鍵指導(dǎo)文件,供藥物開(kāi)發(fā)商用于規(guī)劃這些關(guān)鍵的臨床前檢測(cè)。例如,2020 年 1 月,F(xiàn)DA 發(fā)布了行業(yè)最終指南“體外代謝和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白介導(dǎo)的藥物相互作用研究",其重點(diǎn)是?體外實(shí)驗(yàn),以評(píng)估涉及藥物代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的 DDI 潛力。體外結(jié)果如何以基于風(fēng)險(xiǎn)的方法為臨床 DDI 研究計(jì)劃提供信息。最終指南是 2017 年指南草案的更新。全球三大主要機(jī)構(gòu)(FDA、EMA、PMDA)之間的期望差異以及 2017 年至 2020 年 FDA 指南的具體更新可以從Brian Ogilvie 博士和 XenoTech 創(chuàng)始人 Andrew Parkinson 博士 ?制作的?2020 年海報(bào)中看出?。
血漿蛋白結(jié)合
滲透性
代謝穩(wěn)定性
代謝物鑒定(Met ID)
反應(yīng)表型分析
CYP酶抑制
CYP酶誘導(dǎo)
藥物轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制
藥物轉(zhuǎn)運(yùn)底物
研究:?血漿蛋白結(jié)合
目的:?確定血漿中可用于人類(lèi)和臨床前物種的靶標(biāo)和脫靶相互作用的結(jié)合藥物和游離藥物的百分比
體外研究期望: ?“在開(kāi)始人體臨床試驗(yàn)之前,通常應(yīng)評(píng)估動(dòng)物和人類(lèi)的體外代謝和血漿蛋白結(jié)合數(shù)據(jù)以及用于重復(fù)劑量毒性研究的物種的全身暴露數(shù)據(jù)。" 1
研究: 滲透性
目的:?測(cè)量滲透性以預(yù)測(cè)腸道吸收和組織分布
體外研究預(yù)期:?研究人員測(cè)量測(cè)試物品跨細(xì)胞系(例如 Caco-2 或 MDCKII 細(xì)胞)或人工膜(例如 PAMPA)的滲透性,并與高滲透性和低滲透性對(duì)照進(jìn)行比較。
研究: 代謝穩(wěn)定性
目的:?測(cè)量人類(lèi)和臨床前物種的體外內(nèi)在清除率
體外研究預(yù)期:?將測(cè)試品與混合的微粒體、S9、血漿或肝細(xì)胞一起孵育,以確定清除率。經(jīng)過(guò)處理的測(cè)試系統(tǒng)用于比較母體化合物與藥物代謝酶相互作用之前和之后的濃度,以確定細(xì)胞/細(xì)胞器內(nèi)是否存在顯著的代謝。
研究:?代謝物表征/鑒定 (Met ID)
目的: ?“確定藥物產(chǎn)生的代謝物的數(shù)量和結(jié)構(gòu),以及代謝途徑是平行的還是順序的"
體外研究期望: ?FDA 建議盡早進(jìn)行代謝物表征和鑒定(“我們鼓勵(lì)在藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中盡早鑒定用于非臨床安全評(píng)估的動(dòng)物與人類(lèi)之間藥物代謝的任何差異。" 2)建議的測(cè)試系統(tǒng)包括人肝細(xì)胞、人肝微粒體或重組酶系統(tǒng)。
研究:?反應(yīng)表型
目的: ?“確定研究藥物是否是代謝酶的底物"
體外研究期望:?在兩個(gè)都認(rèn)可的測(cè)試系統(tǒng)中監(jiān)測(cè)底物損失或代謝物形成的有效方法。申辦者“應(yīng)該同時(shí)使用"經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的、可重復(fù)的分析方法:人肝微粒體(+10 名供體)、人重組 CYP 酶。如果某種酶對(duì)藥物消除的貢獻(xiàn)率>25%,則需要進(jìn)行臨床 DDI 研究。
標(biāo)準(zhǔn):主要細(xì)胞色素 P450 酶(CYP1A2、CYP2B6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4/5)
如果合適的話(huà),還可以添加:其他 CYP(CYP2A6、CYP2J2、CYP4F2、CYP2E1)、I 期酶(MAO、FMO、XO、AO)、II 期酶(UGT)
研究:? CYP 酶抑制
目的: ?“確定研究藥物是否是代謝酶的抑制劑"
體外研究預(yù)期:?對(duì) 7 個(gè)主要 CYP(CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4/5)具有可逆(直接)和 TDI(時(shí)間依賴(lài)性抑制)。測(cè)試系統(tǒng)包括人肝微粒體、重組CYP表達(dá)系統(tǒng)的微粒體、肝細(xì)胞。
研究: CYP?酶誘導(dǎo)
目的: ?“確定研究藥物是否是代謝酶的誘導(dǎo)劑"
體外研究預(yù)期: 標(biāo)準(zhǔn):主要 CYP(CYP1A2、CYP2B6、CYP3A4/5)的誘導(dǎo)潛力
如果合適的話(huà),還可以補(bǔ)充:如果 CYP3A4/5 產(chǎn)生陽(yáng)性誘導(dǎo)結(jié)果,則跟進(jìn) CYP2C 家族(CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19)
測(cè)試系統(tǒng)包括來(lái)自至少三個(gè)供體的可平板冷凍保存或新鮮分離的人肝細(xì)胞或永生化肝細(xì)胞。
研究: 藥物轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制
目的:? “確定研究藥物是否是轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的抑制劑"
體外研究預(yù)期:?轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白研究的時(shí)間建議可能會(huì)根據(jù)化合物的分子特性而有所不同(“每種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的體外評(píng)估時(shí)間可能會(huì)根據(jù)研究藥物的治療適應(yīng)癥而有所不同")以及當(dāng)前的指導(dǎo)建議針對(duì)每種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白類(lèi)型使用不同的測(cè)試系統(tǒng)。
標(biāo)準(zhǔn):P-gp、BCRP、OATP1B1、OATP1B3、OCT2、MATE1、MATE2-K、OAT1、OAT3
附加(如果適用):BSEP、OCT1 3
研究:?藥物轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白底物
目的: ?“確定研究藥物是否是轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的底物"
體外研究預(yù)期: ABC/外排:P-gp和BCRP(但不推薦用于高溶解性、高滲透性藥物)
SLC/攝取:如果肝臟(OATP1B1、OATP1B3)和腎臟(OAT1、OAT3、OCT2、MATE1、MATE2-K)底物電位表明肝臟攝取/消除,則應(yīng)根據(jù) ADME(吸收、分布、代謝、排泄)數(shù)據(jù)進(jìn)行評(píng)估或腎分泌顯著。