進(jìn)樣量以及最佳流速受色譜柱尺寸限制。理想情況下，如果樣品與流動相使用相同的溶劑，進(jìn)樣量范圍如下：

最佳進(jìn)樣量與色譜柱的柱體積相關(guān)，因此取決于色譜柱的橫截面積（A = π r²）和長度（L）。您可以根據(jù)現(xiàn)有方法的進(jìn)樣量估算調(diào)整后的進(jìn)樣量。如果要轉(zhuǎn)換為不同內(nèi)徑（ID）的色譜柱（包裝材料和長度保持不變），只需將當(dāng)前進(jìn)樣量乘以新舊色譜柱的半徑平方之比即可確定新方法的正確進(jìn)樣量。

會發(fā)生溶劑效應(yīng)，通常會導(dǎo)致峰變形、靈敏度差和保留時間縮短等問題。例如毒物分析中的PFAS 分析中的 PFBA 會容易受溶劑效應(yīng)影響，因此我們建議使用與初始流動相相近的溶劑來避免溶劑效應(yīng)。如果不便于這樣做，請在確保溶劑與流動相可以混溶的前提下盡量減小進(jìn)樣體積來消弱溶劑效應(yīng)。

術(shù)語“色譜柱體積"通常是指空隙體積，它代表二氧化硅顆粒之間的流動相體積。空隙體積可以通過總柱體積（ π r² L）乘以對應(yīng)色譜柱的裝填系數(shù)來獲得。對于全多孔色譜柱，計算空隙體積（mL）的公式為 V = 0.68 π r² L，其中 V = 柱體積，單位為 mL；r = 柱截面半徑，單位為厘米；L = 柱長，單位為厘米。對于表面多孔的色譜柱，例如我們的 Raptor 色譜柱，系數(shù)不同，空隙體積（mL）的公式為 V = 0.50π r²L 。

當(dāng)通過 HPLC 分析金屬敏感化合物時，流路中最大的金屬面積是液相色譜柱的柱管。對柱管內(nèi)壁進(jìn)行惰性化處理的 Inert 色譜柱，可以消除金屬敏感化合物與金屬之間的非特異性吸附。從而為這類化合物提供更好的峰形和響應(yīng)。

如果您使用的液相儀器不是惰性 HPLC 系統(tǒng)，有可能需要對 HPLC 管路進(jìn)行鈍化，因?yàn)閺倪M(jìn)樣器到色譜柱之間流路中的金屬可能會對某些金屬敏感化合物產(chǎn)生一定影響。具體鈍化方法，歡迎您聯(lián)系我們獲取針對性的幫助。